在接觸過很多國標(biāo)的實(shí)驗(yàn)后，不少人可能會發(fā)現(xiàn)：大部分實(shí)驗(yàn)的測定結(jié)果是比較穩(wěn)定的，即平行樣品之間結(jié)果差異較小，但有的實(shí)驗(yàn)偏差卻很大，定量結(jié)果可能相差了10倍，甚至有可能出現(xiàn)沒有檢出的情況。很多時(shí)候我們都不知道這是由什么原因造成的，也不知道應(yīng)該怎么解決。
今天作者就按照一般實(shí)驗(yàn)流程的步驟和大家分享一下相應(yīng)的原因和解決方法，希望能對大家有所幫助。
舉一個(gè)例子，涼果蜜餞中的添加劑檢測，對于這種需要剪碎的固體樣品，取樣量對于結(jié)果的影響是比較大的。因?yàn)樯a(chǎn)工藝決定了每顆蜜餞上的添加劑含量都不一樣，這可能還取決于每顆蜜餞的比表面積，因此對于類似的樣品或者項(xiàng)目，取樣量一定要大。另外，不同的樣品需要用樣品專用的儲存袋裝好，避免樣品之間的污染，還需要根據(jù)樣品本身的特性選擇適宜的儲存溫度。
解決辦法：增加制樣量、對樣品儲存架或冰箱進(jìn)行整理，不同的樣品類型使用不同的冰箱，并經(jīng)常進(jìn)行清理，避免霉菌的滋生。
很多化合物是需要避光、避熱或者易氧化分解的，例如青霉素、維生素A、葉黃素等。這類物質(zhì)本身是不穩(wěn)定的，如果操作過程中稍有不慎，就可能會分解，導(dǎo)致測定結(jié)果偏低。
此外，有些化合物對于溶液本身的pH比較敏感，例如一些鹽類或者胺類化合物。當(dāng)pH不同時(shí)，其在溶液中多帶的電荷數(shù)可能會不一樣，這會導(dǎo)致同一種物質(zhì)會有多個(gè)不同出峰時(shí)間的色譜峰，如果只算其中一種形態(tài)，也有可能導(dǎo)致結(jié)果偏低。又如花青素，其共軛結(jié)構(gòu)會隨pH的不同而發(fā)生改變，對于液相色譜法來說，這不只是出峰時(shí)間的改變而已，還會對紫外吸收的光譜產(chǎn)生影響。
解決辦法：根據(jù)化合物的特性盡量避光避熱、也可以適當(dāng)加入抗氧化劑，如維生素C、亞硫酸鈉、碘化鉀等，另外在提取后可以調(diào)節(jié)溶液的pH或者使用具有緩沖能力的流動相。
在提取過程中，樣品沒有充分分散，會導(dǎo)致提取不充分，例如在奶粉里脂肪酸的測定中，樣品需要水浴加熱的情況下，發(fā)生甲酯化反應(yīng)，期間需要保證樣品不會聚在容器底部，否則測定結(jié)果會偏低。另外，提取時(shí)間和提取溫度是否達(dá)到實(shí)驗(yàn)所需的條件也是需要重點(diǎn)關(guān)注的因素。
而凈化所帶來的目標(biāo)物損失，也是取決于凈化方法的操作細(xì)節(jié)，例如分散固相萃取的時(shí)間和用量，固相萃取的淋洗液、洗脫液極性及pH，樣品含量是否過載等。
解決方法：在提取溶液加入后先確保樣品分散均勻。在超聲的過程中多次取出搖勻或者使用搖床或者渦旋振搖的提取方式，促進(jìn)目標(biāo)物在溶液中分散均勻，使?jié)舛雀爝_(dá)到平衡點(diǎn)。如果出現(xiàn)凈化后結(jié)果偏低或者重復(fù)性較低的情況，則可以對每一步的溶液中的目標(biāo)物濃度進(jìn)行測定，以找出具體在哪一步出現(xiàn)較大的損失，再進(jìn)行調(diào)整。
在實(shí)驗(yàn)的過程中，除了目標(biāo)物受到污染之外，有時(shí)候目標(biāo)物本身也是一種污染物，例如鄰苯二甲酸酯、雙酚A、壬基酚、高氯酸等，這些化合物作為待測定目標(biāo)物時(shí)，往往容易受到環(huán)境的污染，導(dǎo)致結(jié)果偏差嚴(yán)重。
解決方法：首先可以對使用的溶劑進(jìn)行本底篩查，若溶劑沒有受到污染，則該瓶溶劑成為該項(xiàng)目的專用溶劑。其次對不同的接觸儀器使用該溶劑進(jìn)行浸泡、測定，找出最易受污染的環(huán)節(jié)，使用“干凈”的儀器進(jìn)行替換。
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