前處理是分析方法開發(fā)中重要的一環(huán),與提取率、凈化效果、分離效果、基質效應等高度相關。選擇適合的前處理方法可有效降低檢測成本,作者對近年來大部分化合物的檢測方法進行了總結。并給出了一些特殊的應用情況,希望能與相關的分析測試工作者進行分享交流。
根據(jù)分子式和已查得物質信息選擇適合溶劑,或者兩種或以上溶劑混合提取,根據(jù)使用的溶劑不同選擇不同的儀器檢測。(以下溶劑均為常用的,數(shù)字為沸點)
液相:水、甲醇64.7、乙醇78、異丙醇82.5、乙腈81、丙酮56.5、鹽緩沖液。
液質:水、甲醇64.7、乙醇78、異丙醇82.5、乙腈81。
氣相:甲醇64.7、乙醇78、異丙醇82.5、乙腈81、正己烷69、甲苯110、乙酸乙酯77、丙酮56.5、二氯甲烷39.8、三氯甲烷61.3。
氣質:正己烷69、丙酮56.5、乙酸乙酯77。
優(yōu)點:前處理快速簡便,溶劑極性可調節(jié)幅度大。
缺點:提取沒有針對性,雜質多,色譜圖雜峰多,質譜基質效應強。

加入兩種互不相溶的溶劑(極性差異較大),使水溶性和油溶性物質分開,其中一個相為提取相,一個相為除雜相。如目標物為油溶性,可先加入正己烷提取,提取后吸出正己烷,用水或酸、堿、鹽水溶液清洗。
優(yōu)點:能清除與目標物極性差異較大的雜質。
缺點:溶劑沒有選擇性,如油溶性目標物用乙醚提取清洗后,不能直接上液相。


固相萃取法是萃取法的延伸方法,在目標物被提取后,提取液通過固相萃取柱的固相進行吸附,經(jīng)過不同極性的溶液淋洗后,有機溶液洗脫。
優(yōu)點:萃取柱的固相材料對目標物選擇性較高,而且富集倍數(shù)高。
缺點:對于多組分化合物,可能會出現(xiàn)某些化合物回收率較低的情況。同時,可能會出現(xiàn)過載的現(xiàn)象。

目標物極性較小,需要用低極性溶劑提取,但由于溶劑沸點較低或極性不適合液相分析。所以對提取凈化后的溶劑氮氣吹干,用水、甲醇、乙腈等極性大的溶劑重新定容。
優(yōu)點:針對不能用甲醇,乙腈提取的低極性目標物,可用低極性溶劑提取,液相分析。
缺點:目標物性質要相對穩(wěn)定,易揮發(fā)、易氧化物質不適用。


加入一定比例的水和乙腈(1:1),提取后加入鹽包,提供相應的緩沖體系,振搖后分層,乙腈層為目標物所在相。此法應用較廣,可用于提取結構較復雜的化合物。
衍生應用:乙腈溶解衍生劑,并作為定容液與水相混合直接加入到樣品當中,于水浴或超聲條件下進行反應,加鹽后乙腈析出。
優(yōu)點:方便簡捷,適用于單相提取或反應,且不需要進行溶劑轉換則可用于液相或液質分析。
缺點:對于多組分的化合物提取,只用單一有機相可能會導致某些化合物回收率偏低。

加入兩種極性差異較大,但能互相混溶的溶劑,提取后加入水相促使兩相分層,適用于選擇低極性溶劑提取的氣相或氣質分析。兩種溶劑其中一種為定容溶劑,一種為衍生劑溶劑且易溶于加入的水相。如加入甲苯和乙酰氯的甲醇溶液,反應后加入Na2CO3溶液,除掉反應副產(chǎn)物并促使甲苯和甲醇分層。


常用的凈化劑有:
PSA?(乙二胺-N-丙基硅烷):主要用于去除脂肪酸和有機酸,這些物質在質譜檢測中是比較常見的基質干擾物。
?C18(十八烷基鍵合硅膠)?:用于去除樣品中的脂肪及低極性雜質?。
?GCB?(石墨化碳黑):用于去除色素,如類胡蘿卜素和葉綠素等,以及一些具有平面結構的雜質及甾醇。
EMR(增強型脂質去除凈化劑):對樣品中脂肪的去除效果較好,且選擇性較高,對目標物影響較小。
Al-N(中性氧化鋁):主要作用力為氫鍵,可吸附分子中具有酸性氧原子的雜質。
硅膠:主要除去表面活性和極性較大的雜質。