隨著質(zhì)譜的應用越來越廣泛，許多國標更新后都會開發(fā)出質(zhì)譜法。不知道讀者是否有這樣的經(jīng)歷：明明是按國標來配制溶液，儀器也是一樣的，甚至更先進、型號更新，但就是無法重現(xiàn)國標的結果，導致擴項工作一直無法順利開展。
今天作者就“無法重現(xiàn)”這個問題講一下個人的看法。
要搞明白這個問題，我們需要排除先入為主的想法，即：先不要認為是人家出錯。有的人也許會覺得：溶液、標準品、儀器都一樣的，但是質(zhì)譜的離子對一個都沒有，甚至連母離子都是找不到，總不可能試劑儀器換了一個品牌就不行吧？這個想法確實是合理的，雖然有些實驗對試劑的要求可能會比較高，但大多數(shù)情況下，國標也不可能在這么高的要求下完成的。
我們或許可以換一個角度來看，是否我們的實驗環(huán)境需要找的目標離子與國標中的會不一樣呢？
舉例，我們都知道質(zhì)譜中，是靠質(zhì)荷比來尋找母離子的，而不是分子質(zhì)量。因為大多數(shù)情況下，無論化合物是通過加合，還是丟失基團的形式形成母離子，由于電荷的斥力作用，會導致母離子內(nèi)部很難存在兩個或以上的相同電荷。
因此大部分的母離子帶電荷數(shù)一般都是1，久而久之，很多人就會認為質(zhì)荷比就是母離子質(zhì)量數(shù)。下圖是檸檬黃色素的結構式，從該結構式可以看出，由于檸檬黃是一種鹽，因此其分子在質(zhì)譜中會很容易丟失不同個數(shù)的Na+，形成相應的帶負電的母離子。
通過計算可以知道，檸檬黃的分子質(zhì)量是534。
如果是丟失一個Na+，那么此時的質(zhì)荷比就是511，這也是母離子的質(zhì)量數(shù)；但如果丟失兩個Na+，那么這時的帶電荷數(shù)就是2了，即質(zhì)荷比為母離子的質(zhì)量數(shù)除以2；而且可能還會有丟失3個鈉的情況，這時候就需要將母離子的質(zhì)量數(shù)除以3。
為什么會出現(xiàn)這個差異呢？其實主要是由于體系中pH的影響所導致的。
由于-SO3Na是離子鍵，在溶液中，檸檬黃會失去所有的Na+。但隨著pH的不同，檸檬黃在丟失Na+之后，-SO3-又會重新與H+結合，導致該位點呈現(xiàn)不帶電的狀態(tài)。因此pH對這類多Na鹽化合物的質(zhì)荷比的影響是巨大的。所以我們首先要排查，目標物的質(zhì)荷比是否錯了。
另外，在找母離子的過程中，如果遇到質(zhì)荷比正確，但響應仍然低的情況，我們還需要留意，目標物所結合的離子是什么，該離子是否在系統(tǒng)中穩(wěn)定存在？
例如，一些化合物的母離子是與Na+結合的，可能在一些經(jīng)常用于檢測食品的儀器中，該化合物會呈現(xiàn)很高響應的[M+ Na]+峰。這是因為食品中含Na元素比較多，因此殘留在儀器中。而對于一些經(jīng)常用于分析藥物的儀器，可能Na元素的殘留就沒那么多了，因此響應就低很多，這會導致無法重現(xiàn)其他方法的結果。
當我們遇到無法重現(xiàn)國標方法的時候，先不要急，更不要放棄。我們可以先將實驗的關鍵點羅列出來，逐條分析、校正，一步一步排查，認真思考實驗環(huán)境是否適合化合物的測定，總能找到解決問題的辦法的。
